Az ELISA-tesztben mit tesznek a primer antitestek és a másodlagos antitestek?

Az ELISA-tesztben mit tesznek a primer antitestek és a másodlagos antitestek?
Anonim

Válasz:

Ez az ELISA vizsgálat típusától függ.

Magyarázat:

ELISA = Enzimkötésű immunoszorbens vizsgálat.

Különböző típusú ELISA-vizsgálatok léteznek. Amire szüksége van:

  • antitestet egy hozzá kapcsolódó enzimmel
  • antigén, amelyhez az antitest kötődik
  • az enzim szubsztrátja, amely mérhető reakciót okoz

A enzim az antitesthez kapcsolt gyakran HRP (torma peroxidáz). A HRP különböző szubsztrátokkal reagálhat, amelyek vagy megváltoztatják a színt, vagy fényt bocsátanak ki.

A kép áttekintést nyújt a különböző típusok ELISA vizsgálati eljárásokkal. Megmagyarázom, hogyan működnek az alábbiakban.

Közvetlen ELISA

A lemezt bevonjuk az antigénnel (Ag) és a primer antitest enzim hozzáadásával. Amikor a szubsztrátot hozzáadjuk, a reakció előfordul és arányos az antitest-antigén kölcsönhatások mennyiségével.

Közvetett ELISA

Ismét egy lemez van bevonva az antigénnel és a primer antitest kötődik az antigénhez. A másodlagos antitest az első antitesthez kötődik. A második antitest tartalmazza a szubsztrátummal reagáló enzimet.

Szendvics ELISA

Itt két vagy három antitest van jelen. A rögzítő antitest a lemezekhez kapcsolódik és az antigénhez kötődik. Ezt követi ugyanazok a lépések, mint a közvetlen (csak egy antitest) vagy a közvetett módszer (két antitest).

Versenyképes ELISA

Néha gátlási ELISA-nak nevezik, egy kicsit bonyolultabb. A lemezt bevonjuk a vizsgálandó antigénnel. A primer antitest az enzimmel először egy azonos antigén ismeretlen koncentrációjú mintával inkubáljuk. Ezt a lemezt ezután adjuk hozzá, lehetővé téve, hogy az antitestek, amelyek még mindig szabadon reagáljanak a lemezen lévő antigénnel. Miután a minta antitest-antigén komplexeit mossuk le a szubsztrátot.

Ha az ismeretlen minta sok antigénnel rendelkezik, kevésbé lesz antitest szabadon kötődni a lemezhez = alsó jel.