Miért fontos, hogy ugyanazt a restrikciós enzimet használjuk a transzgenikus organizmus létrehozásához használt mindkét szervezet DNS-ének hasításához (vágásához)?

Miért fontos, hogy ugyanazt a restrikciós enzimet használjuk a transzgenikus organizmus létrehozásához használt mindkét szervezet DNS-ének hasításához (vágásához)?
Anonim

Válasz:

Lásd lentebb…

Magyarázat:

A specifikus szekvenciákon levágott restrikciós enzimeket úgy kell alkalmazni, hogy ugyanazt a restrikciós enzimet kell használni, mert olyan fragmenseket állít elő, amelyek ugyanazon komplementer ragadós végekkel rendelkeznek, lehetővé téve a kötések kialakulását közöttük.

Vannak olyan kompatibilis restrikciós helyek, amelyek együtt használhatók. Az Xho1 és a Sal1 példák. Öntapadó végeik megegyeznek, és így össze lehet kötni őket. De a ligáció megöli mind az Xho1, mind a Sal1 helyet, így nem használhatja egyiküket sem a vágáshoz (a ligációs helyeken).

Az exonukleáz vagy PCR használatával a legtöbb ragadós véget is létrehozhat (5 vagy 3 túlnyúlások) a tompa helyekbe - ily módon egy tompa vágóhelyre lehet ligálni - de ez általában megöli a tompa helyet is.