Miért tartják a restrikciós enzimeket 50% -os glicerin oldatban?

Miért tartják a restrikciós enzimeket 50% -os glicerin oldatban?
Anonim

Válasz:

Hogy megőrizzék őket …

Magyarázat:

Restriction Az enzimeket nagyon kis mennyiségben használják, de általában valamivel nagyobb mennyiségben vásárolják.

Ha semmi más, akkor általában jobban szeretne különböző teszteket végezni ugyanazon tételben. A megvásárolt tételt ezért hosszabb ideig kell tárolni.

A legtöbb enzim egy darabig tökéletesen boldog a 4 ° C-os pufferben, de végül romlik. 24 óra általában az elfogadott határérték.

Hosszabb távú tároláshoz a tételt le kell fagyasztani. -20C a szabvány, és több hónapig fogja megtartani. Még hosszabb ideig (például egy vagy több évig) a -70C a norma.

Gyorsan fagyasztani kell, és kis tartályokban (pl. Eppendorfokban), hogy túlságosan gyakran elkerüljük a felolvasztást / fagyasztást.

Annak érdekében, hogy az ilyen alacsony hőmérsékleten a fehérje károsodását elkerülje, stabilizátorokat lehet hozzáadni, pl. A DTT (Di-Thio-Treitol), a szérumalbumin és a legfontosabb, a glicerin (5-50%).

Furcsa módon a -20 ° C-on 50% -os glicerint kell használni, míg a -70-es glicerin nem igazán szükséges, bár hozzáadásával stabilizálható a fehérje.