Válasz:
A GAPDH-t gyakran betöltési vezérlőként használják.
Magyarázat:
A Western blottingban gyakran használjuk a GAPDH-t töltési vezérlőként. Ez azt jelenti, hogy a GAPDH tesztelésével ellenőrizhetjük, hogy van-e betöltött egyenértékű fehérje mennyisége a blot különböző sávjain.
Alkalmazási példa - mondjuk, van olyan betegségünk, amelyet úgy gondolunk, hogy egy adott fehérje emelkedését okozza a sejtben. Egy "egészséges" sejtből és egy másik "beteg" sejtekből álló mintát készítünk. Ezután mindkét minta egyenértékű fehérje mennyiségét töltjük be a Western-blotra szolgáló gélre.
Miután kipróbáltuk az érdeklődésre számot tartó fehérje blotját, azt tapasztaltuk, hogy a beteg sejtekben a fehérje szint valóban megemelkedik (ez a sötétebb sáv a bloton keletkezik). Annak bizonyítására, hogy ez a növekedés a fehérje expressziójának változásából adódik, a betöltő artefakt helyett (vagyis minél több instense sávot okoz a fehérje expressziójának változása a sejtekben, és nem véletlenül többet töltünk be) a "betegség" mintája, mint az "egészséges"), azt is megvizsgáljuk, hogy a GAPDH blotja megmutatta, hogy a teljes fehérje szintek azonosak mindkét sávban.
Ezzel tehát azt mutatjuk, hogy az egyenértékű fehérje a két sávban van feltöltve, és hogy a megfigyelt sávintenzitás változása a fehérje expressziójának változásából adódik a kívánt fehérje esetében.