Mi az a fehérjék SDS-PAGE?

Mi az a fehérjék SDS-PAGE?
Anonim

Válasz:

A fehérjék elválasztása molekulatömegük alapján.

Magyarázat:

Az SDS-PAGE a fehérjék elektromos térben történő elválasztása a molekulatömegük alapján.

A fehérjéket denaturáljuk 70 ° C és 100 ° C közötti hőmérsékleten melegítve olyan vegyületek jelenlétében, mint a 2-merkaptoetanol vagy a ditiotreitol, és az SDS (nátrium-dodecil-szulfát). A merkaptoetanol vagy a ditiotreitol megszakítja a fehérje diszulfidkötéseit, és kibontakozik és lineárisvá válik (mint egy hosszú húr, amely nem hajtogatja). Az SDS segíti a kibontakoztatási folyamatot, és negatív töltéssel fedezi a fehérjét is.

Az elegyet ezután egy poliakrilamid gélre (az SDS-PAGE PAGE bitjére) felvittük és egy elektromos áramot alkalmaztunk. A negatív töltésű fehérjék az elektromos mezőben mozognak. A PAGE megakadályozza, hogy a nagyobb fehérjék nagyon gyorsan mozogjanak a kis fehérjékhez képest (a PAGE úgy működik, mint egy szita). Az eredmény az lesz, hogy a nagy fehérjék közel maradnak a gél kezdetéhez, míg a kis fehérjék tovább mozognak a PAGE-ban.

Az alábbi videóban láthatja az SDS-PAGE-t: